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準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果體現(xiàn)出PCR熒光試劑盒的原理點(diǎn)擊次數(shù)：1740 更新時(shí)間：2019-09-26

　　PCR熒光試劑盒用于檢測(cè)動(dòng)物綠膿桿菌核酸。綠膿桿菌是SPF實(shí)驗(yàn)大、小鼠必須檢測(cè)并排除的病原菌之一，因此快速、準(zhǔn)確做好實(shí)驗(yàn)動(dòng)物綠膿桿菌檢測(cè)十分重要?；赟YBR Green I染料法的基本原理，綠膿桿菌特異性引物與變性的DNA分子通過(guò)PCR反應(yīng)生成雙鏈DNA，SYBR Green I與雙鏈DNA結(jié)合發(fā)出熒光，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步，通過(guò)熒光信號(hào)，對(duì)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。

　　PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；剛開(kāi)始時(shí), 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步?；蛘呤褂脽晒馊玖蟂YBR。SYBR可以結(jié)合到雙鏈DNA上面，當(dāng)體系中的模板被擴(kuò)增時(shí)，SYBR可以有效結(jié)合到新合成的雙鏈上面，隨著PCR的進(jìn)行，結(jié)合的SYBR染料越來(lái)越多，被儀器檢測(cè)到的熒光信號(hào)越來(lái)越強(qiáng)，從而達(dá)到定量的目的。

　　一般說(shuō)來(lái)，應(yīng)選用口碑較好的經(jīng)過(guò)大量客戶(hù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的PCR熒光試劑盒，因?yàn)橹挥羞x對(duì)了試劑盒才能夠做成漂亮的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)，特別是對(duì)于一些珍貴的樣品更不能因?yàn)楣?jié)約一些蠅頭小利而破壞了樣品本身。PCR熒光試劑盒在研發(fā)之初就考慮到了一般科研環(huán)境中方方面面的影響，例如我們就光照強(qiáng)度、光照時(shí)間對(duì)本產(chǎn)品的影響做了嚴(yán)苛的實(shí)驗(yàn)論證，得到1ml本產(chǎn)品盛裝于1.5ml離心管中放置在光照強(qiáng)度下可以保存12h，超過(guò)12h產(chǎn)品性能則會(huì)下降。

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